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ELISA特點
免疫酶技術ELISA法是一項先進的免疫化學測定技術,自20世紀60年中期問世70年代初發(fā)展以來,引起了許多學者有關技術人員的重視。這是因為免疫酶技術有其*的優(yōu)點,主要表現(xiàn)在以下幾個方面:
專一性強??乖c抗體的免疫反應是一專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
1.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
2.樣品易保存。經(jīng)過酶反應顯示的有色產物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
3.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
4.可以定量測定。溶液中的抗原物質,應用酶免吸附技術進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
5.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫沒技術都能在較短時間內完成。
6.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產應用單位均易購置。
此外,各項免疫酶技術,操作比較簡單,工作人員的操作安全性較高。如果將抗原聯(lián)結了酶,那么,用所得到的酶標記抗原就可以檢測相應的抗體。
20世紀80年代和90年代,免疫酶技術發(fā)展出現(xiàn)了許多與生物素-親和素、電化學、光學和DHA聚合酶鏈式反應相結合的新技術,出現(xiàn)了與分子生物學PCR技術交叉聯(lián)合的趨勢,從而擴大了酶免技術的使用范圍,進一步提高了檢測的靈敏度,提高了短時間內檢測大量樣品的能力。
經(jīng)過許多科學家和技術人員的努力,免疫酶技術生出許多分支,其中有免疫酶標固相載體方法的酶聯(lián)免疫吸附測定法,及ELISA和dot-ELISA,具有吸附能力的小球狀物載體方法,即DASS等;免疫酶標組織化學法;非標記免疫酶的‘抗體搭橋’法和PAP法以及免疫酶標電鏡技術和非標記免疫酶電鏡技術等。這些技術可以根據(jù)不同的材料和不同的研究課題予以采用。
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