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021-65232515
BCIP/NBT Kit(40×)
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒(40×)
目錄號:K0051
保存條件:2-8℃保存。
Cat. No. | K0051 |
Kit Size | 40 ml |
40×BCIP | 1 ml |
40×NBT | 1 ml |
BCIP/NBT-顯色液 | 40 ml |
組分說明
本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途
產(chǎn)品簡介
BCIP (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate) 5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸鹽+NBT (四
唑硝基藍)是堿性磷酸酶(AP)理想的底物組合之一。在堿性磷酸酶的催化下,BCIP
會被水解而產(chǎn)生強反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物與 NBT發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍色至藍
紫色化合物。該試劑盒可用于AP系統(tǒng)的IHC和Western Blot實驗的酶促顯色。在AP催
化下,在組織切片或印跡膜上結(jié)合了 AP偶聯(lián)物的地方產(chǎn)生深藍色沉淀,可根據(jù)顏色反
應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達情況。
注意事項
1.工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用,配制好的工作液1小時內(nèi)有效。
2.工作液用量必需充足,保證*覆蓋組織片或印跡膜。
3.為獲得理想實驗結(jié)果,請務(wù)必優(yōu)化實驗條件。
4.NBT有毒,使用時請采取必要的防護措施。
5.本產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體實驗或人體治療。
操作步驟
1.BCIP/NBT顯色工作液配制:
根據(jù)需要量,將40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT-顯色液以1:1:38的體積比混勻
后,即為BCIP/NBT顯色工作液。
2.顯色:
1)印跡膜顯色:將配制好的工作液滴加在印跡膜上(或?qū)⒂≯E膜傾入到BCIP/NBT
顯色工作液中),室溫避光孵育3-10分鐘。顯色完畢后,將膜浸入水中,終止反應(yīng)。
2)組織切片或細胞爬片顯色:滴加適量的BCIP/NBT顯色工作液于需要顯色的組織
切片或細胞爬片上,室溫避光孵育3-10分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時間,當(dāng)達到
理想顯色效果后,自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明,封片后
可長期保存。
實驗代做服務(wù):
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