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包涵體蛋白溶解液說(shuō)明書
更新時(shí)間:2020-08-06 點(diǎn)擊量:1832

                                                                                                                    

包涵體蛋白溶解液說(shuō)明書

 

InclusionbodyDenatureReagent

Cat.No.  K0007   

保存:2 - 8 ℃       

 

組分說(shuō)明

 

                                             Cat.No.      K0007A

                                             Volume       100ml

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

 

      包涵體是重組蛋白因?yàn)檫^(guò)度表達(dá)、蛋白無(wú)足夠時(shí)間進(jìn)行肽鏈折疊,部分折疊中間態(tài)之間的特異性錯(cuò)誤聚合形成的一種不溶性結(jié)構(gòu)。這些基因表達(dá)產(chǎn)物的氨基酸序列雖然正確,而其立體結(jié)構(gòu)是錯(cuò)誤的,因此一般沒(méi)有生物活性。包涵體一般含有50%以上的重組蛋白,其余為外源蛋白、核糖體元件、RNA 聚合酶、內(nèi)毒素、外膜蛋白 mpC、ompF 和ompA 等、核酸(環(huán)狀或缺口的質(zhì)粒DNA),以及脂體、脂多糖等,無(wú)定形,呈非水溶性,只溶于變性劑如尿素、鹽酸胍等。使用本產(chǎn)品提取包涵體蛋白,可增加包涵體蛋白的溶解性,提高包涵體蛋白的提取效率,變性劑可通過(guò)透析去除。

 

注意事項(xiàng)

 

 1.  本試劑含有變性劑,操作時(shí)請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。

 

 2.  在低于4℃的保存溫度下易出現(xiàn)絮狀沉淀,使用時(shí)恢復(fù)至室溫,絮狀沉淀溶解后即可進(jìn)行后續(xù)步驟。

 

操作步驟 

 

 1. 用細(xì)菌裂解液或其他方法裂解菌液后提純包涵體。

 

 2. 1g 包涵體濕重中加入8ml 包涵體蛋白溶解液(粗略估算包涵體濕重)。

 

 3. 加入溶解液后混勻,振搖孵育 30 分鐘。

 

 4. 離心去除細(xì)胞碎片。

 

 5. 收集上清液,進(jìn)行后續(xù)步驟測(cè)試。

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

蛋白雙向(2-D)

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh)

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙?;?/a>

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測(cè)

動(dòng)物造模/模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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