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CHO-K1中國倉鼠卵巢細(xì)胞(懸浮細(xì)胞)傳代/復(fù)蘇技巧
更新時(shí)間:2024-07-03 點(diǎn)擊量:231

CHO-K1中國倉鼠卵巢細(xì)胞(懸浮細(xì)胞)

,CHO K1

貨號:YJ-c005CHO-K1種屬鑒定)

價(jià)格: 5800.0

規(guī)格: 1*10 6

細(xì)胞名稱CHO-K1倉鼠卵巢細(xì)胞亞株

描述:該細(xì)胞株是源自成年中國倉鼠卵巢深入活體組織切片的CHO細(xì)胞的亞克隆。

動物種別:中國倉鼠  

組織來源:卵巢

形態(tài):上皮細(xì)胞

細(xì)胞馴化前的培養(yǎng)基的培養(yǎng)條件:F12K培養(yǎng)基(SIGMA,貨號N3520,添加NaHCO3 2.5g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。

含量>1x106 細(xì)胞數(shù)

規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途:僅供科研使用。

細(xì)胞株馴化:

復(fù)蘇CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)入T25 cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以F12K基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加10%血清培養(yǎng),待細(xì)胞長滿單層后,加入 0.25 % 胰蛋白酶消化,傳代至裝有完全培養(yǎng)基的T25 cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶(Corning)中繼續(xù)培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞鋪滿瓶底時(shí),即得貼壁 CHO-K1 細(xì)胞。取貼壁CHO-K1 細(xì)胞,換液,加入15 mL含血清的完全基和 15 mL無血清CHO-K1專用培養(yǎng)基,2天后吸出一半培養(yǎng)液,加入等量的無血清CHO-K1,每2天重復(fù)一次此操作,直到胎牛血清濃度低于 1 %后,以基礎(chǔ)培養(yǎng)基B001 繼續(xù)培養(yǎng),即培養(yǎng)基中血清濃度依次以 5 %,2 .5 %,1.25%,0.625 %,0 %降低。細(xì)胞在無血清CHO-K1專用培養(yǎng)基中密度達(dá)到5 ×106cells/ mL時(shí),即得懸浮 CHO-K1 細(xì)胞。培養(yǎng)條件:37℃,5 % CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

CHO-K1中國倉鼠卵巢細(xì)胞(懸浮細(xì)胞)傳代/復(fù)蘇技巧


注意事項(xiàng)

1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。

3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。

4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。


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